实验室中稀释几个细节处理

1、温度 1.1采精前的准备 在采集前所有与接触的物品包括采精杯、分装瓶(如果有条件)等全部要在恒温箱37 ℃预热(适季节变化,预热温度也将有变化),保证在采精的时候与其接触物品温度相差不高于0.5 ℃。稀释也要提前预热,放在37 ℃水浴锅中,保证稀释液混合均匀。实验室空调设置为25 ℃最为适宜。 1.2的稀释 稀释液和原精的温差不得高于0.5 ℃,否则将严重影响稀释后的精子活力。 1.3的分装、保存与运输 稀释后要立即进行分装,从恒温箱中取出分装瓶,使稀释后和分装瓶的温差不高于0.5 ℃。分装后不宜将立即放入17℃保温箱中保存,让在室温25 ℃缓慢降温后,再将其放入保温箱。运输过程中同时要应用恒温箱,以保证精子的活力不受到任何影响。 2、称重 将电子天平清零,然后把预热好的保温杯称重,再交由生产人员采精。把装有的保温杯再次称重。 重量=采精后的保温杯重-预热后的杯重 体积=重量 保温杯中重量的准确性 实验室负责预热保温杯以及称量稀释。在每次保温杯预热和称重的过程中,都会有6至40 g的误差。 造成误差的原因:在采精前,保温杯需要预热,方法使用37 ℃温水盛满保温杯,然后倒掉,放入集精袋和滤纸。在这个过程中,保温杯的内外壁都沾有水,外壁可以擦去,而为了不影响保温杯内温度,内壁一般不擦。这就影响了保温杯整体重量。 如果里面有过多的水没有倒掉,就会有大的误差,即使杯中无水分倒出,也会有10 g的误差。误差量的存在,可能影响生产中对个别猪的使役,以及对猪的饲喂管理。解决方法:1应该在每次采集称重后适当减去水引起的误差部分。 2实验室人员在做保温杯时尽量将水倒干,避免误差过大。 3、各项直观指标测定 3.1容量:新鲜容量应在100~ 250 mL ;过多可能混有尿液或副性腺有炎症,过少说明采精方法不当或公猪生精能力降低。 3.2色泽:色泽应为乳白色到灰白色,红色说明有血液,绿色说明有脓液,清说明混有尿液,色泽不正常的必须废弃。 3.3气味:应没有明显异味,有腥味说明有脓液,有臊味说明混有尿液,有异味的必须废弃; 3.4密度测定:估测,可通过的外观检查如色泽估测精子密度,呈乳白色说明精子密度大,白度越高说明浓度越高,相反则说明精子密度低。 4、的稀释 经过品质检查合格的应立即进行稀释,将稀释液缓慢倒入中,并轻轻搅动或摇动。稀释时,最好仍放在原来的袋中。一般可根据需要和计算(估算)的稀释倍数、量,在中加入适量的稀释液。最少稀释倍数为1:2.5,最大稀释倍数不超过1:9。 如果是收集的是全份(不包括精清),可按1:3稀释,稀释后每个剂量应为80 mL,每个剂量含20 mL鲜精,这样可保证每个剂量中有30~60亿个精子。同样,如果是浓份,可按1:7稀释,每个剂量80 mL,每份含鲜精10 mL。 5、存放时间 采精后应及时进行全份稀释,保证精子活力。有试验表明浓份2小时左右精子活力为0。 精子应在将稀释后置室温(25℃左右)2小时,然后放入保存箱 (17 ℃)。